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CLOVER嘔吐毒素親和柱的IAC-SEP原理和使用注意事項

更新時間:2022-07-26      點擊次數(shù):2105

 

嘔吐毒素親和柱的原理和使用注意事項

原理

樣品經(jīng)提取液提取、過濾、稀釋,然后通過鍵合有嘔吐毒素特殊抗體的免疫親和柱。此時,嘔吐毒素被親和柱中的抗體特異性的吸附,用水或緩沖液將免疫親和柱IAC-SEP上的雜質(zhì)除去,然后用甲醇使抗體變性,從而將嘔吐毒素從親和柱上洗脫下來。最后,用HPLC或熒光計進行定量檢測

注意事項

  1. 使用前,免疫親和柱需回至室溫(2225℃)。

  2. 樣品添加回收試驗時,標準品添加到樣品中,靜置2小時后或過夜,再進行樣品前處理,否則會出現(xiàn)回收率偏低的現(xiàn)象。

3)     操作步驟中,樣品過柱,淋洗,洗脫時,一定要控制好流速,不能太快,否則會使檢測結(jié)果偏低。

4)     如果將標準品直接過柱驗證回收率時,一定要確保標準上柱液中甲醇濃度不要超過5%,否則會影響柱子的吸附能力。

5)     試驗中使用的玻璃儀器等,一定要清洗干凈,尤其是用次氯酸等處理過的儀器,否則會使檢測結(jié)果偏低。

6)     當用氮氣濃縮洗脫液時,氮氣流不要太大,否則會損失部分嘔吐毒素。

 

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